国际输血协会:血小板免疫生物学工作部

发布时间:2010年09月10日 来源:南宁输血医学研究所血小板免疫学网 阅读次数:

法国国家输血医学研究所  Cecile KAPLAN 

南宁输血医学研究所  李恒聪 译  周燕 校

原文见ISBT Science Series(2008)3.145-147 ]

  
近50年来,人们逐渐认识到免疫性血小板减少症可导致一系列严重的临床症状。从产科学到胎儿医学,从儿科学到内科学,医生每天都会遇到严重到中度的血小板减少症。严重的血小板减少有出血的危险,明确何原因导致血小板减少症是治疗的关键。
    现已知免疫性血小板减少症的发病机理是由于血小板抗体的存在使血小板遭破坏。多年来已开发出大量的血小板抗体检测技术和血小板抗原鉴定方法。
    国际输血协会(ISBT)/国际血液学标准委员会(ICSH)血清学专家组对血小板血清学领域日渐重视,1981年在已故的A.von dem Borne教授的组织下,创办了血小板血清学工作部。从此,国际血小板血清学研讨会和后来的血小板免疫学研讨会得以有规律的组织开展。
    前三届研讨会由位于阿姆斯特丹的荷兰红十字输血服务部的中心实验室组办。1986年,决定由不同的参加者轮流组办研讨会。现在,研讨会由该届ISBT大会举办国的一个实验室组办。
    目前血小板免疫学研讨会致力于分享知识、评估现行使用技术,建立熟练检测方法并形成标准。总之,这些研讨会被组办成“湿”格式的研讨会。
    每届研讨会都设有特定的研讨目标。组办者会向全球范围的实验室发一个调查问卷,然后评估本届活动中众实验室的研究兴趣。
  组办实验室负责标本选择、收集和发放。然后评估各实验室的结果。结果和评估报告将在研讨会上讨论。该报告通常由组办实验室撰写并发表在《Vox Sanguinis》杂志上。从第一届研讨会举办以来,参加研讨会的实验室在逐渐增加。
    吴国光教授组办的2008年研讨会成为国际合作的典范,来自23个国家的40个实验室参加了该届研讨会。
    每届研讨会有自己的研究专题。

血小板血清学 
    多年来,关于血小板血清学的研究,与已知和未知抗血清的交换、新技术的检测一道,成为各届研讨会的主要研讨项目。
    血小板免疫荧光技术是第一个被工作部接受的国际标准技术,用于新开发检测方法的验证比对,直至抗原捕获法的出现。
    利用血小板抗体的特性可以使特异性血小板抗体与HLA抗体区分开。因此大家对用氯喹去除HLA抗体很感兴趣。
    对血小板膜生物化学的更深入了解和更新的技术如免疫印迹和免疫沉淀的应用,使自身抗原和新的血小板同种抗原的鉴定成为可能。然而,这些新技术都有其局限性,并且耗时,因此难以常规性开展。
    鼠单克隆抗体的出现使以诊断为目的的抗原捕获技术成为现实。1987年 V. Kiefel描述了血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定检测技术(MAIPA),该技术是至今使用最为广泛的血小板血清学技术。MAIPA技术是目前血小板免疫学上的金标准参比技术。
    在血小板血清学中,技术的标准化是多届研讨会的一个研讨热点,特别是在由15个国家的28个实验室参加的、在开普敦举办的第13届国际血小板免疫学研讨会上尤为突出。

血小板基因分型
    特异性血小板同种抗原的鉴定是一件令人关注的事情。第一步是用已鉴定的参比血清做血小板表型分型。MAIPA技术可实现该目的。现今,分子生物学有了突飞猛进的发展。血小板抗原多态性是由编码膜糖蛋白基因的单核苷酸多态性导致的氨基酸替换引起的。血小板同种抗原的基因分型已成为开展血小板免疫学工作实验室的常规方法。评价不同检测方法的准确性、可靠性和检测方法的标准化,是1997年研讨会的目标。
    直到现在,血小板基因分型还是国际血小板工作部的全部或部分时间的工作。多聚酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)和PCR限制性片段长度多态性分析被广泛用于血小板基因分型。然而,近来的研究显示,在PCR引物区域的沉默突变可能导致前述两种技术分型结果不一致,从而可能造成错误的诊断。因此,在当前的研讨会中,已采用可对PCR-SSP技术造成影响的带有突变的DNA标本来评价各实验室自己的基因分型方法。

血小板命名
    ISBT血小板工作部积极参与血小板命名。许多血小板抗原系统以前用不同的名字表示。1990年,血小板工作部决定采用一种新的命名方法,即人类血小板抗原(HPA)的系统命名法。该命名原则为:根据文献公布时间的先后顺序用数字来命名,按频率由高到低用字母来编号抗原等位基因。新增加的抗原系统需要得到工作部的同意。HPA系统命名法要基于血清学的发现。1995年,工作部的成员一致通过建立基于分子遗传学的补充命名法。
    2003年,创建了血小板命名委员会,并作为ISBT血小板工作部与国际血栓形成和止血学会(ISTH)间的联系平台。血小板命名委员会将发挥血小板命名维护者的作用。

血小板工作部与血小板免疫性疾病
    随着血小板血清学和分子生物学技术的进步,血小板免疫性疾病的实验室诊断水平已经得到提高。
    当检测到母亲含有血小板同种抗体,而该抗体是由遗传自父亲的胎儿血小板抗原刺激母体而产生,新生儿同种免疫性血小板减少症的诊断是简单的。连续多届研讨会已致力于评估实验室检测抗体或抗体组合和进行准确的基因分型的能力。
    对实验室和临床办法的评估是第12届国际研讨会的研究内容之一。

结论  
    研讨会是一项独特的分享技术进步和临床知识的活动。研讨会的工作已形成建议、报告,并致力于建立标准化试剂。全球范围内参加者的工作和ISBT血小板免疫学工作部的经验交流,已成为推动血小板免疫学发展的主要力量。

 

本栏目负责人:李恒聪


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