第16届国际输血协会(ISBT)血小板免疫学研讨会概况
第16届国际输血协会(ISBT)血小板免疫学研讨会于2012年7月在墨西哥召开,研讨会由巴西圣保罗市Blood Bank Hospital Sirio Libanês的Dr.Rita Fontão Wendel主持,就以下7个研究项目(Exercise)展开讨论:
(1)血清盲样的血小板抗体鉴定
(2)不同标本类型(血清和血浆)对MAIPA法检测结果的影响
(3)应用主办方提供的抗-HPA-1a WHO标准血清、单克隆抗体及MAIPA检测方案定量检测标本抗-HPA-1a的浓度
(4)血小板裂解液的稳定性及MAIPA法检测血小板自身抗体在ITP患者诊断的应用
(5)基于Luminex平台检测抗-HPA-1a及抗-HPA-1b
(6)应用单克隆抗体检测血小板HPA-5b的表型
(7)HPA基因分型及罕见HPA基因的研究
全球共有34家实验室参加本届研讨会,其中我国南宁、杭州和广州的3家实验室参加本次研讨会。
本届国际血小板免疫学研讨会7个项目的研讨结果如下:
(1)血清盲样的血小板抗体鉴定:
本项目提供5份盲样血清样本,要求参与实验室鉴定血清中所含的血小板抗体特异性。该项目研究对提高各实验室血小板抗体鉴定的能力起到重要作用,各实验室对抗-HPA-1a、抗-HPA-5b、常见HLA抗体及阴性对照的检测结果很好。但是,对于较少出现的抗-HPA-2b以及从ITP病人检测的抗-GPIIbIIIa血小板自身抗体,个别实验室仍需优化其检测方法及技术。检测结果如下:
(2)不同标本类型(血清和血浆)对MAIPA法检测结果的影响:
本项目研究未发现血清和血浆对抗-HPA-1a、抗-HPA-5b的定量分析有差异,而本研究实验的某些因素可能对研究结果产生影响:如各实验室抗体滴度分析和抗体定量单位Arbitrary Units (AU) 未达成一致;参与的实验室较多,主办方无法提供足够的血清样本,只能用复钙血浆代替血清。
(3)应用主办方提供的抗-HPA-1a WHO标准血清、单克隆抗体及MAIPA检测方案定量检测标本抗-HPA-1a的浓度:
应用统一的抗-HPA-1a WHO标准血清、单克隆抗体及MAIPA检测方案,各实验室可定量检测抗HPA-1a的浓度。各实验室可根据本方案建立本实验室的血小板定量检测技术。
(4)血小板裂解液的稳定性及MAIPA法检测血小板自身抗体在ITP患者诊断的应用:
本项目通过2个不同批次的血小板裂解液检测,评估了血小板裂解液的保存条件的重要性,推广MAIPA法检测血小板自身抗体在ITP的实验室诊断的应用。
(5)基于Luminex平台检测抗-HPA-1a及抗-HPA-1b:
有大部分质控样品(29/36)检测结果一致性达到100%,个别实验室由于实验本底较高导致假阳性结果,而这可以用更严格的cut-off.计算公式校正;微球检测技术在血小板抗体滴度检测上比MAIPA法的灵敏度更高;微球检测技术在各实验室HPA-1a抗体检测中取得很高的灵敏度和重复性。
(6)应用单克隆抗体检测血小板HPA-5b的抗原表型:
HPA基因型通过使用抗HPA-5b确认其抗原表型,
表型(MAIPA法)/基因型关系: HPA-5b+: 99/103: 96%; HPA-5b- : 75/75 : 100%
表型(IF法)/基因型关系:HPA-5b+: 17/21 : 81%; HPA-5b: 13/13: 100%
(7)HPA基因分型及罕见HPA基因的研究:
各实验室HPA基因分型结果取得很好的重复性,重要的HPA系统((HPA-1, 2,3及15)一致性达100%。
PCR-SSP仍是HPA基因分型的首选方法。
作者:钟周琳 校对:李丽兰
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